节肢动物防护指南 版本3.2

作者:时间:2020-03-20

本指南由美国热带医学和卫生学会昆虫学委员会发表。新澳门葡萄京8814实验动物中心翻译。

此翻译件仅供学习参考,欢迎批评指正。

翻译丨 裴佩

审校丨 卢选成

节肢动物防护1

ACL-1适用于未感染或感染非致病性病原体的节肢动物操作,包括(1)已存在于当地地理区域的节肢动物,无论当地是否有活跃的虫媒传染疾病流行发生;(2)外来的节肢动物,无法在当地存活或仅能暂时存活,无法引起活跃的媒介传播疾病流行。该类别包括大部分有教学意义的媒介节肢动物。对防护水平的简要总结如表1所示。

 

标准操作

节肢动物的位置。包含节肢动物的容器和孵化器放置的位置应可能避免意外接触和开启。可将节肢动物放置在非主干道、避开走廊的位置或壁橱中。

储存。保证足够的空间,以便于节肢动物逃脱后及时发现。例如,尽可能减少与节肢动物饲养和实验无关且可供其繁殖栖息的材料(如,草,未使用的容器,杂物)。

一般节肢动物消除。设施内部的任何意外来源的节肢动物应被清除。在材料溅出后及时清理操作台面,因水或土壤中可能含有未孵化的虫卵。例如,蚊媒实验室的工作人员应立刻清除实验室的积水。

主要容器清洁和灭虫。应当采取适当措施以防操作不慎使节肢动物从主要容器中逃脱。对笼子和其他培养容器进行适当清洁,以防止节肢动物存活或者逃逸(例如,加热到或低于致死温度)。

主要容器。放置节肢动物的笼盒应有效防止其在任何发育阶段逃脱。如果使用筛网,注意筛网应耐用、尺寸合适,合适,以防止其逃脱。建议使用牢固的笼子。袋子、饲养托盘等注意不要泄漏导致动物逃脱。

节肢动物的处理。在处理前处死所有发育阶段的节肢动物。使用热水或冷冻处死动物后,冲入下水道或放入垃圾袋中。

主要容器标识与标签。节肢动物是用描述性标签来识别的,包括物种、应变来源、收集日期、负责的研究者等;标签牢固地贴在容器上(如果可拆卸,则加以遮盖)。放置处于活动受限阶段节肢动物(卵、蛹、冬眠成虫)的器皿也应被明确标识,并妥善保存,以防其进展到可活动的阶段后逃脱。

防止节肢动物经人或下水道意外播散。工作人员应采取适当的预防措施,在每个安全等级(主要容器、环境室、实验室等)采取适当的处置方法,防止活的活动节肢动物在饲养室内运输或传播,防止其播散到人身上。

节肢动物逃逸监测。研究人员应评估是否发生了节肢动物逃逸。建议形成有效的节肢动物捕捉方案来监测动物逃逸情况。

有害生物排除方案。制定有害生物排除方案,防止野生节肢动物(家蝇、蟑螂、蜘蛛等)和啮齿类动物的捕食、污染和潜在感染。

减少节肢动物繁殖空间。应适当减少节肢动物繁殖与栖息空间。家具和支架等应尽可能小且易于移动,以便于清洁及寻找逃逸节肢动物。

节肢动物标志。应根据机构监督委员会的建议放置节肢动物标识,告知可能进入该区域的人员。

特殊操作:脊椎动物的使用

机构批准。如果要使用脊椎动物来喂养吸血节肢动物,研究人员应咨询其所在机构研究监督办公室,强烈建议由IACUCIBC进行审查。

脊椎动物饲养。用作宿主或血源的动物应根据机构实验室动物指南进行饲养。必要时脊椎动物可置于节肢动物设施进行饲养,但应保证其不会接触到逃逸的节肢动物。在实验室环境中,对于维持节肢动物不必要的动物不应该接近吸血性节肢动物。

饲喂注意事项。使用宿主动物喂养吸血节肢动物时应特别注意,容器应足够坚固以防动物逃逸,节肢动物吸血后处理或移除脊椎动物时应采取措施防止节肢动物通过屏幕、遮盖物逃逸或飞走。应仔细检查宿主动物的毛皮,耳朵,腋窝或节肢动物其他可能的藏身之处。最后,应采取一切预防措施,防止节肢动物意外转移到宿主笼子中,如果动物及其笼子被送回其他设施,节肢动物就会扩散。

血源。血源是引起节肢动物意外感染和传播的可能来源。在可行的情况下,建议使用已知无特定病原体的无菌血液或血液,而应避免使用疾病状态不确定的动物或人类血液。在某些情况下,如果未使用采集自志愿者人类血液饲喂,节肢动物不适应且不繁殖。这类节肢动物不能由其他志愿者的血液进行二次饲喂;以动物或人类血液的薄膜喂养的动物,此后不能进行志愿者血液饲喂。

防护设备(一级屏障)

手套。用宿主动物或血液来饲喂节肢动物时应佩戴乳胶或橡胶手套,即使当地风险评估和政策机构对意外情况提供了说明。

防护服。在饲养室内接触血液和吸血节肢动物时必须穿着实验服,即使当地风险评估和政策机构对意外情况提供了说明。

节肢动物特定个人防护设备。应使用恰当的个人防护设备,如防节肢动物过敏原的口罩、面罩、头套,即使当地风险评估和政策机构对意外情况提供了说明。

防护设施(二级屏障)

饲养室位置。饲养室应设在独立的区域,尽可能远离楼内主要交通干道。

饲养室门。开启饲养室门时应使用硬性面板、玻璃、屏幕或塑料薄片予以遮盖,避免节肢动物逃逸及野生节肢动物进入。

饲养室窗。如果饲养室有窗户,保证其能有效防止最小的节肢动物逃逸及阻止野生节肢动物害虫进入。

无饲养室。未设有饲养室,节肢动物应放置在节肢动物防护一级的房间内。如果房间内没有可防止野生节肢动物进出的二级屏障,未设在远离主要交通干道的位置,必须建立明确的操作规程,降低可能存在的风险。例如,可在饲养蚊子的笼子外再套一个更大的笼子;分离成年蚊子时可以抽吸器放在垂直放置的笼袖外,用采样容器完全罩住外面的笼子。或者,在诱捕个体蚊子之前对整个捕蚊器进行冷冻。使用有机玻璃手套盒进行操作,特别是进行外来节肢动物相关操作时。无飞行能力的节肢动物应在指定的被水围成的平台上进行操作,并饲养在有二级防护的其他容器中,如有盖的塑料食品盒。

 

节肢动物防护2

涉及感染生物安全2级病原的外来或本地节肢动物的操作,此类病原与人或动物疾病密切相关,有明确证据(实验室诊断)显示感染此类病原体,实行节肢动物防护2级。明确节肢动物是否感染病原应由PI进行风险评估。例如,在疾病暴发过程中捕捉并保存至实验室的活蚊子,对实验人员造成的风险比常规监测时分类、鉴别的冷冻灭活蚊子要大得多。非感染的转基因节肢动物,当基因修饰对生存力,存活率,宿主范围或群体数量没有或只有负面影响时,也实行节肢动物防护2级。ACL-2ACL-1的基础上设定了操作方案、规程、饲养容器、设备等方面的要求,在动物饲养、处置及设备设计要求等方面更为严格。此外,准入资格要求也更为严格。在活跃的传播区域或在有可能建立的情况下,在ACL-2条件下传播受感染的外来节肢动物的决定通常要求必须采取其他方式仅建议或优先采取的措施作为政策。在ACL-2条件下,在活跃的传播区域或可建立活跃传播区域饲养感染性的外来节肢动物,通常要求实施政策明确或未明确但被推荐为首选的措施。

标准操作

节肢动物饲养位置。节肢动物的容器和孵化器放置应避免实验人员、保管人员、服务人员意外接触和开启。可将节肢动物放置在远离主干道的专用房间、壁橱中。无飞行能力节肢动物如蜱通常放置在初级容器(小瓶)中,再放置在干燥器或塑料食品盒之类的容器内;通常,这些都是在环境屏障中操作的。尽管建议将专用空间用于长期饲养蜱虫,但由PI或其他专家联合当地IBC或其他机构实体进行适当的风险评估后,蜱虫也允许饲养在非设施。

储存。该区域的设计和维护旨在检测逃逸的节肢动物。在设施不要放置操作不需要的设备和仪器。所有饲养用品都应放于设施指定区域,不要放在开放区域。建议放在带紧身门或抽屉的密闭储藏室。门和抽屉只有在进入时才打开。节肢动物的食物应保存在密封的容器中。

培养容器清洁和灭虫。除了像ACL-1中那样清洁笼子和培养容器以防止节肢动物外逃外,根据IBC批准的协议和或实验室标准操作程序,对容器进行化学消毒,如果用于受感染的材料,则对容器进行高压灭菌。为了降低降低未污染与可能污染的废物混合的风险,可采用不同的处理方法,实验室可能需要考虑对所有容器进行常规高压灭菌,焚烧或其他适当的净化。

培养容器。用来装节肢动物的笼子是防震的,并且用大小适当的网筛来防止动物逃逸。容器最好是可蒸压的或一次性的。建议在放入和取出节肢动物时设计用于防止逃逸的开口。

节肢动物处理。在通过冷冻或其他合适的方法处理节肢动物之前,必须处死动物的所有生命阶段。受感染的节肢动物应进行高压灭菌,或根据特定药剂风险评估,用化学消毒剂(如10%漂白剂或70%乙醇)进行消毒。缺乏高压灭菌器或焚烧方法应通过当地风险评估和寻求适当的替代方法来降低风险。


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